تسلسل الجيل الجديد — NGS في قبرص
التسلسل من الجيل الجديد (NGS) هو تقنية مخبرية متقدمة تسمح بتحليل عدد كبير من المناطق الجينية أو الكروموسومية في وقت واحد باستخدام كمية محدودة من DNA مأخوذة من خلايا جنينية ضمن سياق الفحص الجيني قبل الانغراس. في مركز Vita Altera لأطفال الأنابيب يُخطط لاستخدام اختبار NGS في قبرص بصورة فردية وفق عمر الزوجين وتاريخهما الجيني وحالة الحمل الكروموسومي والأحمال السابقة وعدد الأجنة ونوع PGT المطلوب.
ما هو تسلسل الجيل الجديد — NGS؟
تسلسل الجيل التالي، ويُعرف بالإنجليزية باسم Next-Generation Sequencing، وهو مجموعة من تقنيات المختبر الجيني التي تتيح تحليل عدد كبير من قطع DNA في الوقت نفسه.
يمكن استخدام تقنية NGS لأغراض مختلفة في الطب مثل بحث الأمراض الوراثية والمتغيرات الجينية والتغيرات الصبغية. ومن استخداماتها في علاج أطفال الأنابيب الفحوص الجينية قبل الزرع للأجنة.
في تحليل NGS للأجنة يجب أولاً تكوين الأجنة بعلاج أطفال الأنابيب. وتؤخذ كمية محدودة من الخلايا من الجنين عند وصوله إلى مرحلة تطور مناسبة ثم يُحلل DNA الخلايا في المختبر الجيني.
بحسب نوع الاختبار المستخدم يمكن البحث عن تغيرات في عدد الكروموسومات، أو اختلالات بنيوية كروموسومية محددة، أو متغير جيني سبق تحديده في الأسرة.
لا. NGS ليس إجراء يعالج الجنين أو يغير بنيته الجينية، بل هو تقنية تحليل جيني توفر معلومات عن عينة DNA مأخوذة من الجنين.
اختبار NGS الجيني في قبرص
اختبار NGS الجيني في قبرص؛ وهو جزء من برنامج متعدد المراحل يشمل الاستشارة الجينية وعلاج أطفال الأنابيب وتطور الجنين إلى مرحلة الكيسة الأريمية وخزعة الجنين وتحليل DNA وتجميد الأجنة ثم نقل جنين مجمد وفق النتائج.
في مركز Vita Altera لأطفال الأنابيب، قبل التخطيط لـ NGS، يُقيَّم التاريخ الصحي للزوجين وفحوصهما الجينية ونتائج النمط النووي والحمل السابق وتاريخ الإجهاض وتقارير علم الأجنة الناتجة عن علاجات أطفال الأنابيب السابقة.
قد يحتاج المختبر الجيني لدى المرضى المخطط لهم إجراء PGT-M أو PGT-SR إلى تحضير قبل بدء العلاج. وقد يُطلب توثيق المتغير الجيني المعروف، أو مراجعة تحاليل الكروموسومات، أو أخذ عينة DNA من أفراد الأسرة.
يمكن للمرضى القادمين من تركيا أو من دول مختلفة مشاركة تقاريرهم الجينية وتقارير أطفال الأنابيب الحالية قبل الاستشارة عبر الإنترنت. وبعد مراجعة الوثائق يمكن وضع خطة للفحوص اللازمة وتحضير المختبر والبرنامج العلاجي التقريبي في قبرص.
التقييم الجيني الأولي
يُراجع التاريخ الشخصي والعائلي للأمراض وتحاليل الكروموسومات والتقارير الجينية الحالية قبل العلاج.
خزعة الجنين وNGS
تُحلَّل عينات الخلايا المأخوذة من الكيسات الأريمية المناسبة باستخدام NGS أو طريقة التحليل الجيني الملائمة وفق نوع PGT المخطط له.
نقل جنين مخصص للحالة
تُوضع خطة النقل من خلال تقييم النتائج الجينية وتطور الأجنة وتحضير الرحم معاً.
ما الفرق بين NGS وPGT؟
NGS تقنية للتحليل الجيني، بينما PGT مجموعة اختبارات سريرية تفحص الأجنة من حيث حالات جينية أو صبغية محددة قبل نقلها إلى الرحم.
NGS
تسلسل الجيل الجديد هو منصة مخبرية تتيح قراءة عدد كبير من قطع DNA في الوقت نفسه وتحليلها بطرق مدعومة بالحاسوب.
- يشير إلى تقنية التحليل الجيني
- يمكن استخدامها في مجالات أمراض واختبارات مختلفة
- يختلف نطاق النتيجة بحسب الاختبار المطبق
- لا يوضح بمفرده أي مرض يجري البحث عنه
- يتطلب تقييماً معلوماتياً حيوياً
PGT
الاختبار الجيني قبل الانغراس هو الاسم العام لفحص أجنة أطفال الأنابيب من حيث حالات كروموسومية أو جينية محددة.
- يشمل أنواع PGT-A وPGT-M وPGT-SR
- يتطلب تكوين الجنين وإجراء الخزعة
- يمكن استخدام NGS أو طرق أخرى في التحليل
- تُفسَّر النتائج مع الاستشارة الوراثية
- لا يعالج الجنين ولا يغيّره
لا. يمكن استخدام NGS في كثير من تطبيقات PGT-A وPGT-SR، لكن اختبارات شخصية مثل PGT-M قد تحتاج أيضًا إلى PCR أو تحليل الارتباط أو تقنيات قائمة على SNP أو طرق جزيئية أخرى بحسب الحالة وتصميم الفحص.
ما الذي يفحصه اختبار NGS للأجنة؟
تختلف الحالات الجينية التي يمكن فحصها بـ NGS وفق لوحة الاختبار وطريقة المختبر وتحضير DNA والهدف السريري.
تغيرات عدد الكروموسومات
ضمن PGT-A يمكن تقييم تغيرات عدد النسخ التي تشير إلى نقص أو زيادة الكروموسومات في الأجنة.
اختلالات الكروموسومات البنيوية
ضمن PGT-SR يمكن البحث عن تراكيب كروموسومية غير متوازنة محددة مرتبطة بحمل انتقالات كروموسومية أو انقلابات.
أمراض أحادية الجين محددة
ضمن PGT-M يمكن فحص المتغيرات الجينية التي تم تحديدها مسبقاً في الأسرة بعد التحضير المخصص للاختبار.
لا. تقيم الفحوص الجينية الروتينية للأجنة فقط التغيرات الصبغية أو الجينية ضمن نطاق التحليل المخطط. ولا تكشف جميع الجينات أو العيوب الخلقية أو مشكلات النمو أو كل الأمراض التي قد تظهر لاحقاً.
PGT-A باستخدام NGS
PGT-A باستخدام NGS، وهو نهج تحليلي يهدف إلى تقييم أعداد نسخ الكروموسومات في عينة DNA الناتجة من خزعة الجنين.
في PGT-A تُضاعف عينة DNA أولاً، ثم يمكن تحليل عدد كبير من قطع DNA بالتسلسل منخفض العمق. وبمقارنة كمية DNA لكل كروموسوم تُبحث إشارات النقص أو الزيادة الصبغية.
قد تُصنف الأجنة في التقرير بعد الاختبار إلى سليم الصيغة الصبغية، أو مختل الصيغة الصبغية، أو موزاييكي، أو دون نتيجة. وقد تختلف مصطلحات التقرير وحدوده بحسب المنصة المستخدمة.
PGT-A اختبار تحرٍ يقيّم أساساً الحالة العددية للكروموسومات. وليس اختبار تشخيص كامل للجينوم يفحص تسلسل جميع جينات الجنين بالتفصيل.
لا. لم يثبت بصورة قاطعة أن تطبيق PGT-A روتينياً على جميع مرضى أطفال الأنابيب يزيد الاحتمال الإجمالي للولادة الحية. وينبغي اتخاذ القرار بتقييم العمر وعدد الأجنة واحتياطي المبيض والأحمال السابقة وأهداف العلاج الشخصية معاً.
PGT-M باستخدام NGS
PGT-M، ويُطبق لتقييم خطر انتقال مرض أحادي الجين محدد معروف مسبقاً في الأسرة أو متغير جيني مرتبط بالمرض إلى الأجنة.
PGT-M ليس فحص NGS عاماً قياسياً. فقد يلزم توثيق المتغير الجيني الذي سيُبحث مسبقاً وإجراء المختبر الجيني تحضيراً خاصاً بالأسرة.
أثناء تحضير الاختبار يمكن فحص علامات DNA القريبة من المتغير الجيني إلى جانب المنطقة الجينية المعنية. وقد يساعد هذا النهج على تقييم النتيجة الجينية للجنين بدرجة أكبر من الموثوقية.
بينما يمكن استخدام طرق قائمة على NGS في بعض برامج PGT-M، قد تستلزم بعض الحالات استخدام PCR أو تحليل الارتباط أو طرق جزيئية أخرى معاً.
لا. في PGT-M يجب تحديد المرض الجيني الذي سيُفحص قبل العلاج. وإذا كان المتغير الجيني المرتبط بالمرض في الأسرة غير معروف، فقد يلزم إجراء فحوص جينية إضافية.
PGT-SR باستخدام NGS
PGT-SR، ويساعد في تحديد الأجنة غير المتوازنة المرتبطة بنقل أو انقلاب أو إعادة ترتيب بنيوي صبغي آخر لدى أحد الزوجين.
قد لا تكون لدى حاملي التوازن الصبغي مشكلة صحية واضحة، لكن أثناء تكوّن البويضات أو الحيوانات المنوية قد توجد مخاطر لانتقال كمية ناقصة أو زائدة من المادة الجينية إلى الجنين.
يمكن استخدام تحليل أعداد النسخ القائم على NGS لتقييم خسائر أو زيادات صبغية محددة قد تنتج من إعادة ترتيب بنيوي.
يجب أن تكون التقنية المستخدمة قادرة على كشف النتائج الصبغية غير المتوازنة المتوقعة. وقد لا تستطيع بعض طرق التحليل التمييز بين الجنين ذي التركيب الصبغي الطبيعي والجنين الحامل المتوازن.
يوضح تقرير النمط النووي الكروموسومات والمناطق التي يتأثر بها التغير البنيوي. وينبغي أن يقيّم المختبر الجيني مسبقاً ما إذا كان NGS أو طريقة التحليل المناسبة تستطيع كشف الاختلالات الناتجة من هذا التغير.
لمن يمكن تقييم اختبار NGS الجيني؟
لا توجد فئة واحدة قياسية من المرضى تنطبق على الجميع لاستخدام NGS في علاج أطفال الأنابيب. وتُحدد الملاءمة وفق الحالة الجينية المراد بحثها وهدف العلاج.
- الأزواج الحاملون لمرض أحادي الجين معروف
- حاملو النقل أو الانقلاب الكروموسومي
- الأشخاص الذين لديهم تاريخ عائلي لمرض وراثي خطير
- الأزواج الذين تم تشخيص مشكلة كروموسومية أو جينية في حمل سابق لديهم
- مرضى مناسبون لديهم فقد حمل متكرر بسبب أسباب كروموسومية
- بعض المرضى في سن إنجابية متقدمة ولديهم عدد كافٍ من الكيسات الأريمية
- الأزواج الذين لديهم عدة أجنة ويجري التخطيط لترتيب نقلها
- الأشخاص الذين اكتمل لهم التحضير الجيني المخصص لاختبار PGT-M أو PGT-SR
- المرضى الذين يراهم اختصاصي الجينات وطبيب أطفال الأنابيب مناسبين معاً
نعم. قد يستطيع بعض الأزواج تحقيق حمل طبيعي، لكن يمكنهم تقييم أطفال الأنابيب وخزعة الجنين وبرنامج PGT مخصص بسبب خطر انتقال مرض جيني خطير.
لمن لا يُنصح بـ NGS روتينياً؟
رغم أن NGS تقنية متقدمة، لا ينبغي افتراض أن اختباراً يبدو أكثر تقدماً أو شمولاً سيوفر فائدة سريرية إضافية لكل مريض.
- من يرغبون بإجراء الاختبار لمجرد توقع ضمان الحمل
- المرضى الذين لم يُحدد لديهم هدف الاختبار ونطاقه
- بعض الأزواج الذين يكون عدد الأجنة الممكن وصولها إلى الخزعة لديهم محدوداً جداً
- من يعتقدون أن نتيجة PGT-A ستكشف جميع الأمراض الجينية
- من يرغبون في اتخاذ قرار نهائي بناءً على نتيجة فسيفسائية من دون استشارة جينية
- من يتقدمون لمجرد اختيار صفة شخصية أو جنس الجنين بصورة روتينية
- الأشخاص الذين لا يقبلون النتائج المحتملة للاختبار وحدوده
قد لا تصل كل بويضة مخصبة إلى مرحلة الكيسة الأريمية أو الخزعة، وقد لا يوجد بعد الاختبار جنين بنتيجة مناسبة للنقل. لذلك ينبغي تقييم الخزعة وتكلفة الفحص والإمكانات الإجمالية للعلاج معاً.
الاستشارة الجينية قبل NGS
تساعد الاستشارة الجينية الزوجين على فهم ما يمكن أن يوضحه الاختبار وما لا يوضحه وكيفية تفسير النتائج المحتملة بصورة صحيحة.
تحديد هدف الاختبار
يُحدد ما إذا كان الفحص سيبحث عدد الكروموسومات أو تغيراً بنيوياً صبغياً أو مرضاً جينياً محدداً.
شرح خطر الوراثة
يُقيَّم ما إذا كان المرض متنحياً جسمياً أو سائداً جسمياً أو مرتبطاً بالكروموسوم X أو يتبع نمط وراثة مختلفاً.
مناقشة النتائج المحتملة
تُناقش مع الزوجين احتمالات أن يكون الجنين سليم الصيغة الصبغية، أو مختل الصيغة الصبغية، أو موزاييكي، أو متأثراً، أو حاملاً، أو دون نتيجة.
خيارات بديلة
يمكن تقديم معلومات عن بدائل مناسبة مثل IVF أو الحمل الطبيعي أو التبرع دون إجراء الاختبار، إضافة إلى التشخيص قبل الولادة.
ينبغي تقييم النتيجة الجينية مع خصائص تطور الجنين والحالة الصحية للأم المرشحة وتحضير الرحم ونتائج الأجنة الأخرى. وتُعد الاستشارة الجينية مهمة خصوصاً في النتائج الفسيفسائية أو غير الواضحة.
ما الفحوصات التي تُجرى قبل NGS والفحص الجيني للأجنة؟
قد تختلف الفحوص المطلوبة بحسب برنامج PGT الذي سيُستخدم NGS ضمنه وبحسب الصحة الإنجابية للزوجين.
التقييمات الجينية
- رأي اختصاصي الجينات
- التقارير الجينية للأم والأب
- النمط النووي، أي تحليل الكروموسومات
- نتيجة الفحص الجزيئي للمتغير الجيني المعروف
- فحوص الحمل الوراثي
- التقارير الجينية لحمل أو طفل سابق
- عينات DNA من أفراد الأسرة عند الحاجة
- التقييم التحضيري لمختبر PGT
تقييمات أطفال الأنابيب
- الفحص النسائي والتصوير بالموجات فوق الصوتية
- AMH وفحوصات الهرمونات اللازمة
- عدّ الجريبات الغارية
- تحليل السائل المنوي
- فحوص الأمراض المعدية
- تقييم الرحم وبطانة الرحم
- فحوص الصحة العامة والملاءمة للحمل
- تقارير أطفال الأنابيب وعلم الأجنة السابقة
يُقيَّم نطاق الاختبار وعمر التقرير والطريقة المستخدمة وتصنيف المتغير الجيني. وإذا وُجدت معلومات ناقصة أو تحتاج إلى تأكيد، فقد تُطلب عينة جديدة أو فحوص جينية إضافية.
كيف يُجرى اختبار NGS الجيني في قبرص؟
تتكون عملية NGS للأجنة من مراحل متتابعة تبدأ بالتحضير الجيني وعلاج أطفال الأنابيب وتمتد إلى خزعة الجنين وتقييم النتائج.
الاستشارة الأولى والتاريخ الصحي
يُقيَّم عمر الزوجين وتاريخهما الصحي والحمل السابق ونتائج أطفال الأنابيب والتقارير الجينية.
الاستشارة الجينية
تُشرح الحالة الجينية التي ستُبحث ونوع PGT المستخدم وخطر الوراثة وحدود الاختبار.
التحضير المخبري المسبق
لـ PGT-M أو PGT-SR يراجع المختبر الجيني التقارير الحالية ويكمل التحضير المخصص اللازم للاختبار.
تحفيز المبيضين بصورة مضبوطة
تُعطى الأم المرشحة أدوية هرمونية مناسبة لعمرها واحتياطي المبيض بهدف الحصول على أكثر من بويضة.
متابعة نمو الجريبات
تُراقب استجابة المبيضين للأدوية بالموجات فوق الصوتية وفحوص الدم اللازمة.
عملية سحب البويضات
تُسحب البويضات التي تصل إلى نمو مناسب بعملية سحب البويضات تحت إرشاد الموجات فوق الصوتية.
إجراء الحقن المجهري
تُحقن البويضات الناضجة بحيوانات منوية مناسبة لتكوين الأجنة. وتُحدد طريقة الإخصاب وفق خطة العلاج الشخصية.
متابعة الأجنة حتى مرحلة الكيسة الأريمية
تُتابع الأجنة الناتجة من البويضات المخصبة لعدة أيام في المختبر.
خزعة الجنين
تؤخذ كمية محدودة من الخلايا من الطبقة الخارجية للكيسة الأريمية ذات التطور المناسب للخزعة بغرض التحليل الجيني.
تزجيج الجنين
بعد الخزعة يُحفظ الجنين مجمداً بطريقة التزجيج إلى أن تكتمل نتيجة الفحص الجيني.
تضخيم DNA
لأن عينة الخزعة تحتوي على كمية محدودة من DNA، تُضاعف المادة الجينية في المختبر إلى مستوى يسمح بتحليلها.
تسلسل الجيل التالي
تُقرأ قطع DNA المحضرة بالتزامن على منصة NGS وتتحول إلى بيانات رقمية للتحليل.
التحليل المعلوماتي الحيوي
تُقيَّم البيانات الناتجة، بحسب هدف الاختبار، من حيث أعداد النسخ الصبغية أو مناطق جينية محددة.
إعداد التقرير الجيني
تُصنَّف نتيجة كل جنين وفق نظام الإبلاغ الموثق في المختبر.
تقييم النتائج
يقيّم الطبيب واختصاصي الجينات وفريق علم الأجنة النتائج الجينية مع معلومات تطور الجنين.
نقل الأجنة المجمدة
يُذاب الجنين الذي اعتُبر مناسباً للنقل ضمن نطاق الاختبار ثم يُنقل بعد تحضير رحم الأم المرشحة.
كيف تُجرى خزعة الجنين؟
خزعة الجنين إجراء مخبري دقيق يسمح بأخذ عدد محدود من الخلايا من طبقة خلوية مناسبة للجنين لغرض التحليل الجيني.
تُجرى الخزعة غالباً في مرحلة الكيسة الأريمية التي يصل إليها الجنين في اليوم الخامس أو السادس، أو في اليوم السابع عند الملاءمة.
تؤخذ عينة الخلايا من الطبقة الخارجية للجنين التي ستسهم لاحقاً في تكوين المشيمة. والهدف هو عدم التدخل مباشرة في كتلة الخلايا الداخلية التي ستكوّن الطفل.
تُنقل الخلايا المأخوذة إلى أنبوب خاص وتُرسل إلى المختبر الجيني، بينما يُحفظ الجنين مجمداً إلى أن تكتمل النتائج.
لا. يمكن لخبرة أخصائيي الأجنة وظروف المختبر المناسبة تقليل المخاطر، لكن لا يمكن القول إن الخزعة والتجميد والإذابة خالية تمامًا من أي خطر على الجنين.
تضخيم DNA والتحليل المعلوماتي الحيوي
لأن خزعة الجنين تحتوي على بضع خلايا فقط، يجب تضخيم DNA بطرق مخبرية قبل التحليل الجيني.
تتيح عملية تضخيم DNA زيادة كمية المادة الجينية في عينة الجنين إلى مستوى يمكن لجهاز NGS تحليله.
بعد التسلسل تُقارن كميات كبيرة من بيانات DNA القصيرة مع الجينوم المرجعي ونماذج المختبر الموثقة باستخدام برامج حاسوبية.
في تحليل PGT-A تُقيَّم الاختلافات في كمية DNA المقابلة لكل كروموسوم لحساب تغيرات أعداد النسخ المحتملة.
تعتمد النتيجة على DNA المستخلص من عدد محدود من خلايا الخزعة وعلى نموذج التحليل المستخدم. ولا يمكن ضمان دقة 100% بسبب موزاييكية الجنين واختلافات تضخيم DNA والحدود التقنية.
كيف تُفسر نتائج NGS؟
قد تُصنف نتيجة NGS بمصطلحات مختلفة وفق نوع PGT الذي طُبق ومعايير الإبلاغ الموثقة في المختبر.
نتيجة سليمة الصيغة الصبغية
تعني أن أعداد نسخ الكروموسومات التي تم فحصها ضمن PGT-A ظهرت متوافقة مع النتيجة الطبيعية.
نتيجة اختلال الصيغة الصبغية
تشير إلى اكتشاف إشارة تفيد بنقص أو زيادة كروموسوم واحد أو أكثر.
نتيجة فسيفسائية
تشير إلى نتيجة وسطية يُعتقد فيها وجود مجموعات خلوية ذات تراكيب صبغية مختلفة داخل عينة الخزعة.
تغير قطعي
قد يشير إلى وجود إشارة فقدان أو زيادة في جزء محدد من الكروموسوم بدلاً من الكروموسوم كاملاً.
عدم الحصول على نتيجة
تعني تعذر الحصول على نتيجة قابلة للتفسير بسبب كمية DNA أو جودة العينة أو أسباب تقنية.
نتيجة PGT-M
يمكن الإبلاغ عن الجنين بأنه مصاب أو غير مصاب أو حامل للمتغير الجيني الذي يجري بحثه.
تعني النتيجة السليمة الصيغة الصبغية فقط أن الخلايا المختبرة أظهرت نتيجة مناسبة من حيث أعداد الكروموسومات التي يشملها التحليل. ولا يعني ذلك تقييم جميع جينات الجنين أو جميع الأمراض الخِلقية أو حالته الصحية المستقبلية بالكامل.
ماذا تعني نتيجة الجنين الفسيفسائي؟
تشير النتيجة الفسيفسائية إلى وجود إشارات لخلايا طبيعية وخلايا تحمل تغيراً صبغياً معاً في عينة الخزعة.
لأن خزعة الجنين تؤخذ من جزء صغير منه فقط، فقد لا تمثل الخلايا المُبلغ عنها الجنين بأكمله بصورة مؤكدة.
قد تكون فرص انغراس الأجنة الفسيفسائية واستمرار الحمل أقل من الأجنة سليمة الصيغة الصبغية. ومع ذلك أدت بعض عمليات نقل الأجنة الفسيفسائية إلى ولادات صحية.
ينبغي تقييم قرار النقل وفق الكروموسوم المتأثر، وما إذا كان التغير قطعياً أو على مستوى الكروموسوم كاملاً، ومعايير تقرير المختبر، والأجنة الأخرى المتاحة، وتفضيلات الزوجين.
في بعض الحالات التي لا يتوفر فيها جنين سليم الصيغة الصبغية، يمكن تقييم نقل جنين موزاييكي بعد الاستشارة الوراثية. وقبل النقل يجب شرح عدم اليقين في النتيجة واحتمال الحمل وخيارات التشخيص قبل الولادة بالتفصيل.
ما الذي يُفعل للجنين الذي لم تُستخرج له نتيجة؟
قد لا يمكن الحصول على نتيجة NGS قابلة للتفسير من بعض عينات الخزعة بسبب كمية DNA المحدودة أو فقدان الخلايا أو مشكلة في تضخيم DNA أو أسباب تقنية.
عدم الحصول على نتيجة لا يعني أن الجنين طبيعي أو غير طبيعي وراثياً، بل يعني أن حالته الجينية لم يمكن تحديدها ضمن نطاق الاختبار.
بعد تقييم خصائص تطور الجنين وعدد الأجنة الحالي وتاريخ الخزعة، يمكن مناقشة إعادة الخزعة أو النقل من دون نتيجة جينية أو مواصلة التخزين.
قد تتطلب إعادة الخزعة إذابة الجنين وأخذ خلايا منه مرة أخرى ثم إعادة تجميده. وينبغي تقييم الآثار المحتملة للإجراءات الإضافية مقابل الفائدة المتوقعة من الحصول على نتيجة جديدة.
الفرق بين NGS وaCGH وFISH
استُخدمت مع مرور الوقت طرق مختلفة لتحليل الكروموسومات في الفحوص الجينية للأجنة. ولكل طريقة دقة تغطية ونطاق وحدود تقنية مختلفة.
FISH
هي طريقة أقدم تقيّم عدداً محدوداً من مناطق كروموسومية معينة بواسطة علامات فلورية، ولا تستطيع فحص جميع الكروموسومات بالنطاق نفسه.
aCGH
طريقة microarray تهدف إلى تقييم فقدان الكروموسومات أو زيادتها على نطاق واسع بمقارنة DNA الجنين بـ DNA مرجعي.
NGS
يتيح إجراء تحليل عدد النسخ الكروموسومية عبر تسلسل عدد كبير من قطع DNA بالتوازي وتقييمها بالمعلوماتية الحيوية.
تُحدد الطريقة المناسبة وفق التغير الجيني المراد البحث عنه، ونظام الاختبار المتحقق منه في المختبر، ومستوى الدقة المطلوب. ولا توجد تقنية واحدة هي الأنسب لجميع الحالات الجينية.
نقل الجنين بعد NGS
بعد اكتمال التحليل الجيني يمكن استخدام الجنين المناسب للنقل ضمن برنامج نقل جنين مجمد عندما يصبح رحم الأم المرشحة جاهزاً.
تقييم النتائج الجينية
تُراجع تقارير NGS معاً من قبل اختصاصي الجينات والطبيب وفريق علم الأجنة.
تحديد أولوية الأجنة
عند وجود أكثر من جنين مناسب، تُقيَّم النتيجة الجينية وخصائص تطور الجنين معاً.
تحضير الرحم
تُحضَّر بطانة الرحم للنقل إما بدورة طبيعية أو بأدوية تحتوي على الإستروجين والبروجسترون.
إذابة الجنين
يُذاب الجنين المراد نقله في المختبر بصورة مضبوطة وتُقيَّم حيويته.
نقل الأجنة
يُنقل الجنين الذي حافظ على حيويته إلى رحم الأم المرشحة باستخدام قسطرة رفيعة.
الحمل والمتابعة قبل الولادة
في حال حدوث الحمل تُقيَّم المتابعات القياسية للحمل إلى جانب فحوص التحري أو التشخيص المناسبة قبل الولادة.
هل يغني NGS عن الفحوص الجينية أثناء الحمل؟
اختبار NGS للأجنة هو فحص عينة خلوية محدودة مأخوذة من الجنين قبل الحمل من حيث حالات جينية محددة. ولا يغني عن جميع فحوص التحري والتشخيص أثناء الحمل.
في حالات الحمل الناتجة بعد PGT وNGS تستمر فحوص الموجات فوق الصوتية الروتينية وفحوص التحري المناسبة لعمر الأم والتقييمات اللازمة للحمل.
بعد PGT-M أو PGT-SR يمكن مناقشة خيارات التشخيص قبل الولادة، مثل أخذ عينة من الزغابات المشيمية أو بزل السلى، مع اختصاصي الوراثة بهدف تأكيد النتيجة.
NGS تقنية مخبرية يمكن استخدامها في فحوص مختلفة. أما NIPT فهو فحص تحرٍ أثناء الحمل يقيّم قطع DNA المشتقة من المشيمة في دم الأم من حيث حالات صبغية محددة.
هل يمكن تحديد الجنس باستخدام NGS؟
قد تظهر تقنياً معلومات عن كروموسومي X وY أثناء PGT-A أو بعض التحاليل الجينية. ومع ذلك يُقيَّم استخدام هذه المعلومات في اختيار الجنين ضمن القواعد الطبية والأخلاقية والقانونية.
عند وجود أمراض وراثية خطيرة مرتبطة بالكروموسوم X في الأسرة، مثل الهيموفيليا أو الحثل العضلي الدوشيني، قد تكون الكروموسومات الجنسية مهمة من حيث خطر انتقال المرض.
في هذه البرامج لا يكون الهدف الأساسي تفضيل جنس شخصي، بل تقييم خطر انتقال مرض جيني خطير.
ينبغي تناول التطبيقات المتعلقة بكروموسومات الجنس وفق التقييم الطبي للطبيب والاستشارة الجينية والمبادئ الأخلاقية واللوائح القانونية الحالية.
العوامل المؤثرة في نتائج NGS وPGT
إمكانية تطبيق الفحص الجيني على الجنين ونجاح العلاج في تحقيق الحمل مرحلتان مختلفتان. وتتأثر النتيجة بعوامل بيولوجية وتقنية كثيرة.
عمر المرأة
قد يؤثر العمر في عدد البويضات الممكن الحصول عليها وفي احتمال وجود تغيرات كروموسومية في الأجنة.
احتياطي المبيض
قد يؤثر عدد البويضات الممكن الحصول عليها وعدد الأجنة الممكن وصولها إلى الخزعة في خيارات العلاج.
خصائص الحيوانات المنوية
قد يؤثر عدد الحيوانات المنوية وحركتها وبنيتها وسلامتها الجينية في الإخصاب وتطور الجنين.
تطور الكيسة الأريمية
قد لا تصل جميع البويضات المخصبة إلى مرحلة الكيسة الأريمية المناسبة للخزعة.
جودة الخزعة
أخذ عينة خلوية كافية ومناسبة مهم لتحليل DNA والحصول على نتيجة قابلة للتفسير.
جودة تضخيم DNA
قد تؤثر كفاءة تضخيم المادة الجينية المستخلصة من عدد محدود من الخلايا بصورة متوازنة في دقة التحليل.
منصة NGS
قد تختلف دقة الفصل ودراسات التحقق وحدود الإبلاغ في الاختبار بحسب نظام المختبر.
فسيفساء الجنين
قد لا تمثل البنية الصبغية للخلايا في عينة الخزعة دائماً جميع خلايا الجنين.
الرحم وعملية نقل الجنين
وجود جنين بنتيجة جينية مناسبة لا يلغي أهمية بنية الرحم وتوقيت النقل والعوامل الأخرى المؤثرة في الحمل.
لا. يمكن لـ NGS توفير معلومات جينية محددة عن الأجنة، لكنه لا يضمن تكوّن جنين مناسب أو بقاءه حيًا بعد الإذابة أو انغراسه في الرحم أو حدوث ولادة حية.
مخاطر وحدود NGS
التسلسل من الجيل الجديد تقنية تحليل جيني متقدمة، لكن توجد قيود تتعلق بخزعة الجنين وتحليل DNA وتفسير النتائج، ويجب شرحها عند استخدام الفحص.
عدم وصول أي جنين إلى مرحلة مناسبة للخزعة
قد لا تُخصَّب جميع البويضات المجموعة، وقد لا تصل جميع الأجنة الناتجة إلى مرحلة الكيسة الأريمية.
عدم وجود نتيجة مناسبة للنقل
قد تُظهر جميع الأجنة التي تم فحصها نتائج غير مناسبة من حيث الحالة الجينية التي يجري البحث عنها.
عدم الحصول على نتيجة
قد يتعذر الحصول على نتيجة قابلة للتفسير من بعض الخزعات بسبب عدم كفاية DNA أو مشكلة في تضخيمه أو لأسباب تقنية.
نتيجة فسيفسائية أو غير واضحة
قد لا تمثل العينة الخلوية المحدودة الجنين بأكمله بشكل قاطع، وقد تظهر نتائج وسطية.
الأمراض غير المشمولة بالفحص
يوفر تحليل NGS معلومات فقط عن الحالات الجينية أو الصبغية المشمولة في نطاق الاختبار المخطط.
إجراءات الخزعة والتجميد
قد تحمل خزعة الجنين والتزجيج والإذابة، ولو بنسبة منخفضة، احتمال تأثر الجنين.
احتمال التصنيف الخاطئ
لا يضمن أي فحص جيني دقة بنسبة 100%. وقد تؤثر العوامل البيولوجية والتقنية في النتيجة.
عدم وجود ضمان لحدوث الحمل
إن نقل جنين ذي نتيجة مناسبة ضمن نطاق الاختبار لا يضمن حدوث الحمل أو ولادة طفل سليم.
لا. لا يغير الاختبار كروموسومات الجنين أو جيناته. والهدف هو توفير معلومات عن خصائص جينية محددة في الخلايا المأخوذة من الجنين.
المزايا المحتملة لاختبار NGS الجيني
تختلف الفوائد المحتملة لـ NGS وفق الحالة الجينية التي يجري بحثها وعدد الأجنة المتاحة وخصائص العلاج الشخصية للمريض.
تقييم واسع للكروموسومات
قد يساعد في تقييم أعداد نسخ الكروموسومات على نطاق واسع ضمن PGT-A.
التحليل المتوازي لعدة أجنة
يمكن تحليل عينات DNA المأخوذة من أجنة مختلفة ضمن برنامج مخبري واحد.
دعم ترتيب الأجنة
لدى بعض المرضى الذين لديهم عدة كيسات أريمية، قد تساعد النتائج الجينية في تحديد أولوية النقل.
تقييم خطر المرض الجيني
في برنامج PGT-M الشخصي المناسب يمكن البحث عن خطر انتقال مرض محدد معروف في الأسرة.
حمل تغير بنيوي كروموسومي
قد يساعد ضمن PGT-SR على تحديد النتائج الكروموسومية غير المتوازنة المرتبطة بالانتقالات أو الانقلابات.
التخطيط لنقل جنين واحد
قد يدعم تقييم الأجنة ذات النتائج المناسبة إلى جانب خصائص تطورها قرار نقل جنين واحد.
أسعار اختبار NGS في قبرص
أسعار اختبار NGS في قبرص، وقد تختلف وفق نوع PGT المستخدم وعدد الأجنة التي ستُخضع للخزعة والتحضير الجيني المخصص ونطاق علاج أطفال الأنابيب.
اختبار NGS للأجنة لا يتكون من رسوم التسلسل وحدها. فقد يشمل العلاج أطفال الأنابيب والحقن المجهري وزراعة الكيسة الأريمية وخزعة الجنين والتحليل الجيني وتجميد الأجنة ونقل الجنين المجمد.
تشمل العوامل الرئيسية التي قد تؤثر في التكلفة الإجمالية ما يلي:
- تطبيق PGT-A أو PGT-M أو PGT-SR
- الاستشارة الجينية والتقييم الأولي
- تحضير PGT-M مخصص
- الحصول على عينة DNA إضافية من أفراد الأسرة
- علاج أطفال الأنابيب والأدوية الهرمونية
- سحب البويضات والتخدير
- إجراء الحقن المجهري
- متابعة الأجنة حتى مرحلة الكيسة الأريمية
- خزعة الجنين
- عدد الأجنة التي ستُفحص
- تضخيم DNA وتحليل NGS
- تزجيج الأجنة وتخزينها
- الحاجة إلى إعادة الخزعة لجنين لم تُستخرج له نتيجة
- نقل الأجنة المجمدة
- تحضير الرحم والأدوية قبل النقل
عند مقارنة أسعار NGS ينبغي التحقق مما إذا كان علاج أطفال الأنابيب وخزعة الجنين والتحليل الجيني وتجميد الأجنة والتخزين ونقل الجنين المجمد مشمولة في السعر المذكور.
تُشارك معلومات نطاق العلاج الحالي والتكلفة بالتفصيل من قبل منسقي المرضى بعد مراجعة تقاريركم الجينية ونتائج أطفال الأنابيب السابقة.
لماذا مركز Vita Altera لأطفال الأنابيب؟
في Vita Altera لا نتعامل مع NGS على أنه مجرد إرسال عينة إلى مختبر جيني، بل كمسار متكامل يشمل اختيار المريض المناسب والاستشارة الجينية وتطور الجنين إلى مرحلة الكيسة الأريمية والخزعة الآمنة وحفظ الأجنة والنقل الشخصي وفق النتائج.
- تخطيط مخصص لـ NGS وPGT
- تقييم PGT-A وPGT-M وPGT-SR
- مراجعة التقارير الجينية قبل العلاج
- الاستشارة الجينية والتنسيق المخبري
- أطباء نسائية وتوليد ذوو خبرة
- فريق متمرس في علم الأجنة والمختبر
- زراعة الكيسة الأريمية وخزعة الجنين
- التنسيق مع مختبرات NGS المتقدمة
- متابعة تطور الأجنة باستخدام EmbryoScope+
- نظام مطابقة العينات والسلامة باستخدام Chip ID
- طرق حديثة لتزجيج الأجنة
- نقل جنين مجمد مخصص للحالة
- الاستشارة عند النتائج الفسيفسائية وغير الواضحة
- دعم منسق مرضى شخصي
- استشارات للمرضى بعدة لغات
- إمكانية الاستشارة الأولية عبر الإنترنت
- متابعة منتظمة قبل العلاج وبعده
يمكن لـ NGS وتقنيات متابعة الأجنة دعم تخطيط العلاج. لكن تكوّن الأجنة والنتيجة الجينية والحيوية بعد الإذابة والانغراس والحمل والولادة الحية تعتمد على عوامل بيولوجية وشخصية كثيرة.
الأسئلة الشائعة حول تسلسل الجيل الجديد — NGS
ما NGS؟
NGS هو الاسم العام لتقنيات تسلسل الجيل الجديد التي تسمح بقراءة عدد كبير من قطع DNA في الوقت نفسه وتحليلها بطرق مدعومة بالحاسوب.
هل NGS والتشخيص الجيني هما الشيء نفسه؟
NGS تقنية تحليل، بينما التشخيص الجيني أو PGT هو مسار اختبار يُصمم وفق المرض الذي يجري بحثه والهدف السريري. ويمكن استخدام تقنية NGS نفسها في فحوص جينية مختلفة.
هل NGS وPGT-A هما الشيء نفسه؟
لا. PGT-A هو اختبار يقيّم التغيرات في عدد كروموسومات الأجنة، بينما NGS إحدى تقنيات المختبر التي يمكن استخدامها في تحليل PGT-A.
هل يمكن إجراء PGT-M باستخدام NGS؟
يمكن استخدام طرق قائمة على NGS في بعض برامج PGT-M. ومع ذلك قد يلزم PCR أو تحليل الارتباط أو طرق جزيئية أخرى وفق المتغير الجيني الموجود في الأسرة.
هل يمكن إجراء PGT-SR باستخدام NGS؟
يمكن استخدام طرق NGS المناسبة والمثبتة لتقييم بعض النتائج الكروموسومية غير المتوازنة المرتبطة بالانتقالات أو الانقلابات.
هل يفحص NGS كامل DNA الجنين؟
في التطبيق الروتيني لـ PGT-A تُقيَّم أعداد نسخ الكروموسومات غالباً بتسلسل DNA منخفض العمق. ولا تُفحص جميع جينات الجنين بالتفصيل للكشف عن جميع الأمراض.
هل يكشف NGS جميع الأمراض الجينية؟
لا. يقيم الاختبار فقط الحالات الصبغية أو الجينية ضمن نطاق التحليل المخطط. ولا يكشف جميع الأمراض أو العيوب الخلقية أو المشكلات الصحية التي قد تظهر مستقبلاً.
هل يتطلب NGS علاج أطفال الأنابيب؟
لإجراء PGT القائم على NGS للأجنة يجب سحب البويضات وإخصابها في المختبر وتكوين الأجنة وإجراء الخزعة.
هل يمكن إجراء NGS لكل جنين؟
لا. يجب أن يصل الجنين إلى مرحلة تطور مناسبة تسمح بالخزعة. وقد لا تصل كل بويضة مخصبة إلى مرحلة الكيسة الأريمية أو الخزعة.
في أي يوم تُجرى خزعة الجنين؟
تُجرى الخزعة غالباً في اليوم الخامس أو السادس، أو في اليوم السابع عند الملاءمة، عندما يصل الجنين إلى مرحلة الكيسة الأريمية.
هل تضر الخزعة بالجنين؟
يأخذ الفريق الخبير عددًا محدودًا من الخلايا من الطبقة الخارجية للجنين في التوقيت المناسب. قد يكون الخطر منخفضًا، لكن لا يمكن القول إن الخزعة وما يليها من تجميد وإذابة خالية تمامًا من المخاطر.
لماذا يُجمّد الجنين بعد الخزعة؟
لأن التحليل الجيني وإعداد التقرير يستغرقان وقتاً، يُحفظ الجنين بالتزجيج بعد الخزعة ثم يُنقل في دورة لاحقة عند ظهور نتيجة مناسبة.
خلال كم يوم تظهر نتيجة NGS؟
قد تختلف مدة ظهور النتيجة بحسب نوع الاختبار وعدد الأجنة وبرنامج المختبر وما إذا كانت هناك حاجة إلى تحضير شخصي مسبق مثل PGT-M.
هل يمكن ألا يظهر أي جنين مناسب في نتيجة NGS؟
نعم. قد تظهر جميع الأجنة التي خضعت للخزعة نتائج غير مناسبة للنقل من حيث الحالة الصبغية أو الجينية التي يجري بحثها.
ماذا يعني الجنين سليم الصيغة الصبغية؟
تعني النتيجة السليمة الصيغة الصبغية أن أعداد نسخ الكروموسومات في الخلايا المفحوصة ضمن PGT-A وُجدت متوافقة مع النتيجة الطبيعية.
هل الجنين سليم الصيغة الصبغية جنين سليم صحياً؟
تعطي النتيجة السليمة الصيغة الصبغية معلومات فقط عن أعداد الكروموسومات ضمن نطاق الاختبار، ولا تضمن أن جميع الخصائص الجينية والصحية للجنين طبيعية.
هل يضمن الجنين سليم الصيغة الصبغية الانغراس؟
لا. قد تؤثر بنية الرحم والخصائص البيولوجية الأخرى للجنين وتوقيت النقل والحالة الصحية العامة للأم المرشحة في نتيجة الحمل.
ما الجنين الفسيفسائي؟
تشير النتيجة الفسيفسائية إلى وجود إشارات لخلايا ذات خصائص صبغية مختلفة معاً في عينة الخزعة. وينبغي تقييمها باستشارة جينية متخصصة.
هل يمكن نقل الجنين الفسيفسائي؟
في بعض الحالات التي لا يتوفر فيها جنين سليم الصيغة الصبغية، يمكن تقييم نقل جنين موزاييكي بعد الاستشارة الوراثية. وينبغي مناقشة الحمل وخيارات التشخيص قبل الولادة بالتفصيل.
ماذا يعني التغير القطعي؟
يعني التغير القطعي وجود إشارة إلى فقد أو زيادة في DNA في جزء محدد من الكروموسوم بدلاً من الكروموسوم بأكمله. وقد تتطلب النتيجة تأكيداً واستشارة وراثية.
هل يمكن ألا تظهر نتيجة NGS؟
نعم. قد يتعذر الحصول على نتيجة قابلة للتفسير بسبب DNA محدود أو فقدان الخلايا أو مشكلة في تضخيم DNA أو أسباب تقنية.
هل يمكن إعادة أخذ خزعة من الجنين الذي لم تُستخرج له نتيجة؟
في بعض الحالات يمكن تقييم إعادة الخزعة. وينبغي مناقشة الآثار المحتملة لإذابة الجنين مرة أخرى وأخذ الخزعة وإعادة التجميد مع الزوجين.
هل يمكن أن يعطي NGS نتيجة خاطئة؟
لا يضمن أي فحص جيني دقة بنسبة 100%. وقد تؤثر محدودية عينة الخلايا وفسيفساء الجنين وتضخيم DNA والعوامل التقنية في النتيجة.
هل يزيل NGS خطر الإجهاض تماماً؟
لا. قد تساعد بعض الفحوص أو الاستراتيجيات على تقليل خطر فقد الحمل المرتبط بأسباب كروموسومية معينة، لكن توجد أيضًا أسباب رحمية وهرمونية وعدوية وبيولوجية أخرى لفقد الحمل.
هل يضمن NGS الحمل؟
لا. وجود جنين بنتيجة مناسبة بعد NGS لا يضمن الانغراس أو الحمل السريري أو استمرار الحمل أو الولادة الحية.
هل يلزم بزل السلى في حمل بعد NGS؟
ينبغي مناقشة خيارات التشخيص قبل الولادة مع اختصاصي الوراثة وطبيب النساء والولادة، ولا سيما بعد PGT-M أو PGT-SR. ويُتخذ القرار وفق الخطر الشخصي ونوع الاختبار.
هل يمكن معرفة الجنس باستخدام NGS؟
قد تظهر في بعض التحاليل معلومات عن كروموسومات الجنس. ويُقيَّم الإفصاح عن هذه المعلومات أو استخدامها وفق الضرورة الطبية والمبادئ الأخلاقية واللوائح الحالية.
هل يمكن اختيار الجنس باستخدام NGS؟
لا ينبغي تقديمه روتينياً لمجرد التفضيل الشخصي. وإذا وُجد خطر لمرض وراثي خطير مرتبط بالكروموسومات الجنسية، فيمكن للطبيب واختصاصي الوراثة تقييمه لأسباب طبية.
هل يحسن NGS الجنين؟
لا. لا يغير NGS البنية الجينية للجنين ولا يعالجها. فهو يوفر معلومات جينية محددة عن عينة الخلايا المأخوذة فقط.
هل يمكن إجراء الاستشارة الأولى عبر الإنترنت؟
نعم. يمكن مشاركة تقاريركم الجينية ونتائج النمط النووي ووثائق الأحمال السابقة وتقارير أطفال الأنابيب مسبقاً.
ما الوثائق التي ينبغي إرسالها قبل القدوم إلى قبرص؟
تسهم مشاركة التقارير الجينية للأم والأب ونتائج النمط النووي وفحوص الحمل الوراثي والنتائج الجينية لأحمال أو أطفال سابقين وAMH وتحليل الحيوانات المنوية وتقارير علم الأجنة في تسهيل التقييم.
كيف يمكن معرفة أسعار اختبار NGS في قبرص؟
قد يختلف السعر وفق نوع PGT المستخدم وعدد الأجنة التي ستُخضع للخزعة والتحضير المخصص للاختبار وتحليل NGS ونطاق برنامج أطفال الأنابيب.
احصلوا على معلومات حول اختبار NGS الجيني في قبرص
إذا كان لدى عائلتكم مرض جيني معروف أو حمل صبغي أو فقدان حمل متكرر أو تاريخ لمشكلة جينية في حمل سابق، يمكن تقييم مدى مناسبة PGT-A أو PGT-M أو PGT-SR القائم على NGS لكم.
سيقوم منسقو المرضى بإيصال تقاريركم الجينية وتقارير أطفال الأنابيب إلى أطبائنا ودعمكم في التقييم الأولي عبر الإنترنت والتحضير للمختبر الجيني وخزعة الجنين وعملية NGS والأسعار الحالية.
